|
|
Studium integrace DNA nádorových virů
Frčková, Tereza ; Saláková, Martina (vedoucí práce) ; Šroller, Vojtěch (oponent)
Většina lidí vnímá viry především jako původce nemocí jako je rýma, chřipka nebo COVID-19. Existují ale i viry, které mohou způsobovat nádorová onemocnění. Je známo hned několik způsobů, jak viry přispívají ke vzniku nádorů. V případě lidských papilomavirů a viru Merkelových buněk se jedná o expresi onkogenů kódovaných ve virových genomech. Kromě toho může docházet k integraci viru do hostitelského genomu, což může také přispět k rozvoji karcinogeneze. V této práci byla využita metoda detekce integrované papilomavirové sekvence pomocí polymerázové řetězové reakce (DIPS PCR) pro detekci integračního zlomu u lidských papilomavirů (HPV)-pozitivních buněčných linií odvozených od karcinomu cervixu, klinických vzorků karcinomu v oblasti hlavy a krku asociovaných s HPV a klinických vzorků karcinomu z Merkelových buněk. V případě karcinomu z Merkelových buněk byla metoda DIPS PCR provedena na vzorcích pocházejících z čerstvě zmražené tkáně a z řezů vzorků nádorů zalitých v parafínu. V případě tonsilárních nádorů asociovaných s HPV se jednalo pouze o čerstvě zmraženou tkáň. Pomocí metody DIPS PCR se podařilo detekovat integrační zlomy u vzorků z čerstvě zmražené tkáně i tkáně uchovávané v parafínu. U detekce integračních zlomů genomu HPV byla vyzkoušena nová sada primerů, která byla optimalizována na...
|
|
|
Studium integrace DNA nádorových virů
Frčková, Tereza ; Saláková, Martina (vedoucí práce) ; Šroller, Vojtěch (oponent)
Většina lidí vnímá viry především jako původce nemocí jako je rýma, chřipka nebo COVID- 19. Existují ale i viry, které mohou způsobovat nádorová onemocnění. Existuje hned několik způsobů, jak viry přispívají ke vzniku nádorů. V případě lidských papilomavirů a viru Merkelových buněk se jedná o expresi onkogenů kódovaných ve virových genomech. Kromě toho může docházet k integraci viru do hostitelského genomu, což může také přispět k rozvoji karcinogeneze. V této práci byla využita metoda detekce integrované papilomavirové sekvence pomocí polymerázové řetězové reakce (DIPS PCR) pro detekci integračního zlomu u lidských papilomavirů (HPV)-pozitivních buněčných linií odvozených od karcinomu cervixu, klinických vzorků karcinomu v oblasti hlavy a krku asociovaných s HPV a klinických vzorků karcinomu z Merkelových buněk. V případě karcinomu z Merkelových buněk byla metoda DIPS PCR provedena na vzorcích pocházejících z čerstvě zmražené tkáně a z řezů vzorků nádorů zalitých v parafínu. V případě tonsilárních nádorů asociovaných s HPV se jednalo pouze o čerstvě zmraženou tkáň. Pomocí metody DIPS PCR se podařilo detekovat integrační zlomy u vzorků z čerstvě zmražené tkáně i tkáně uchovávané v parafínu. U detekce integračních zlomů genomu HPV byla vyzkoušena nová sada primerů, která byla optimalizována na...
|
|
| |
|
| |
|
|
Informovanost zdravotníků v oblasti gynekologie o prevenci vzniku karcinomu děložního hrdla
Havlíková, Tereza ; Sláma, Jiří (vedoucí práce) ; Šimonová, Daniela (oponent)
Bakalářská práce zpracovává téma informovanosti zdravotníků v oblasti gynekologie o prevenci vzniku karcinomu děložního hrdla. Práce shrnuje základní informace o primární a sekundární prevenci, rizikových faktorech a klinických symptomech karcinomu děložního hrdla. Rovněž obsahuje informace o diagnostice a následné léčbě pacientky s karcinomem děložního hrdla Hlavním cílem práce bylo zjistit, která ze skupin zdravotníků bude mít největší znalosti o prevenci karcinomu děložního hrdla. Byly stanoveny celkem čtyři výzkumné hypotézy, z nichž tři byly potvrzeny a pouze jedna vyvrácena. K řešení byl zvolen kvantitativní typ výzkumu. Sběr dat byl uskutečněn pomocí dotazníkového šetření, které proběhlo na Gynekologicko - porodnické klinice 1. LF UK a VFN v Praze. Dotazník o dvaceti šesti otázkách byl v papírové formě rozdán mezi zdejší lékaře, porodní asistentky a zdravotní sestry. Konečná velikost výzkumného souboru byla sto respondentů. Všechny otázky byly zodpovězeny zcela dobrovolně a anonymně. V rámci analýzy dat byly vytvořeny tabulky a grafy shrnující výsledky šetření. Hlavním zjištěním byla mnohem větší informovanost skupiny lékařů o problematice prevence karcinomu děložního hrdla. Ostatní skupiny zdravotnického personálu - porodní asistentky a zdravotní sestry - disponovaly menší mírou znalostí....
|
|
|
Immunological aspects of head and neck cancer in relation to etiology
Koucký, Vladimír ; Bouček, Jan (vedoucí práce) ; Říhová, Blanka (oponent) ; Smilek, Pavel (oponent)
Nádorová imunologie je progresivně se rozvíjející multidisciplinární vědní obor. Výsledky základního výzkumu již navíc byly úspěšně přeneseny do klinické praxe a okamžitý úspěch nových imunoterapeutických přípravků, především blokátorů kontrolních bodů imunitního systému, dále vede k podpoře a růstu výzkumu v této problematice. V případě karcinomů hlavy a krku (HNSCC) byly identifikovány některé složky imunitní odpovědi, jako například CD8+ T lymfocyty, které hrají významnou roli v průběhu onemocnění. HNSCC je navíc rozmanitá skupina nádorů, kdy významná část z nich je indukována vysoce rizikovými kmeny lidského papilomaviru (HPV). HPV-asociované nádory (HPV+ ) mají lepší odpověď na standardní léčbu a právě imunitní odpověď byla identifikována jako jeden z hlavních faktorů zodpovědných za tento jev. V naší práci jsme se zaměřili na analýzu fenotypu, funkčních vlastností a prognostické hodnoty tumor-infiltrujících leukocytů u pacientů s HNSCC se zohledněním HPV statutu tumoru. Detekovali jsme CD8+ tumor-infiltrující T lymfocyty reaktivní vůči antigenům HPV16 u většiny HPV+ orofaryngeálních karcinomů. Tyto T lymfocyty byly schopny po specifické stimulaci HPV-derivovanými peptidy produkovat důležité prozánětlivé cytokiny, IFNγ a TNFα. Produkce cytokinů pak byla umocněna kombinovanou blokádou dvou...
|
|
|
Funkční analýza diferenciálně exprimovaných miRNA v buněčných liniích HPV pozitivních a HPV negativních odvozených od nádorů různé anatomické lokalizace
Krbušek, David ; Saláková, Martina (vedoucí práce) ; Dostálová Merkerová, Michaela (oponent)
MikroRNA (miRNA) jsou malé nekódující RNA regulující genovou expresi. Expresní profily miRNA ukázaly řadu diferenciálně exprimovaných miRNA specifických pro nádory asociované s lidskými papilomaviry (HPV). Mezi tyto miRNA se řadí miR-139-5p, která má v těchto nádorech sníženou expresi. V diplomové práci proto byla studována role miR-139-5p v in vitro modelech buněčných liniích, které jsou HPV pozitivní (CRL-3240, SiHa) a HPV negativní (FaDu, C-33A). V buněčných linií transfekovaných mimikující miRNA miR-139-5p byla sledována schopnost proliferace a migrace buněk. Buněčná proliferace byla studována pomocí MTT metody, zatímco pro hodnocení migračních schopností buněk byly využity dvě metody, metoda hojení ran a metoda transwell. Za využití databází TargetScan a miRDB byly predikovány mediátorové RNA (mRNA) cílových genů miR-139-5p. Změna exprese cílových genů, stejně jako ověření úspěšného zvýšení exprese miRNA v buněčných liniích, byla ověřena pomocí metody RT-qPCR. Zvýšení exprese miR-139-5p ve všech buněčných liniích nevedlo ke statisticky signifikantním změnám (p≤0,05) v proliferačních ani migračních schopnostech. Jako cíle mimikující miR-139-5p byly vybrány mRNA genů FOS, JUN, KIF13A a GDF10. Transfekované buněčné linie nevykazovaly výrazné snížení exprese cílových mRNA. U buněčné linie SiHa...
|
|
|
Význam složení a funkčních vlastností imunitního infiltrátu nádorového mikroprostředí pro klinický průběh nádorů hlavy a krku
Hladíková, Kamila ; Špíšek, Radek (vedoucí práce) ; Plzák, Jan (oponent) ; Reiniš, Milan (oponent)
Nádory hlavy a krku představují z imunologického hlediska velmi komplexní a heterogenní skupinu onemocnění. Původně byly tyto nádory spojovány především s kouřením a alkoholem. V posledních desetiletích ale výrazně narůstá procento nádorů asociovaných s perzistující infekcí lidským papilomavirem s onkogenním potenciálem v imunologicky privilegované oblasti tonzilárních krypt. Vzhledem k nezastupitelné roli imunitního systému, jak v protivirové, tak v protinádorové imunitní odpovědi je prognóza pacientů významně ovlivněna velikostí, složením a funkční kapacitou imunitního infiltrátu v nádorovém mikroprostředí. Pro nádory hlavy a krku je charakteristické silně imunosupresivní prostředí, zhoršující průběh onemocnění a snižující účinnost imunoterapie. Většina pacientů s touto diagnózou dobře odpovídá na standardní terapii, ta je ale spojená s velmi závažnými časnými a pozdními toxicitami, které mají zásadní vliv na kvalitu života. V roce 2016 byla schválena první imunoterapeutika pro léčbu refrakterních nádorů hlavy a krku - inhibitory kontrolních bodů imunitních reakcí blokující PD-1 - PD-L1 dráhu, nivolumab a pembrolizumab. Tento druh terapie, založený na odblokování imunosuprese, se v protokolech kombinujících více léčebných modalit ukázal být velmi účinný a zároveň výrazně méně toxický oproti...
|
|
|
Postoje a znalosti o očkování proti HPV IV
Jelínková, Tereza ; Zimčíková, Eva (vedoucí práce) ; Kolmanová, Eliška (oponent)
Postoje a znalosti o očkování proti HPV IV Autor: Tereza Jelínková Školitel: PharmDr. Eva Zimčíková Ph.D. Úvod Infekce lidskými papilomaviry (HPV) se řadí mezi nejčastější sexuálně přenosné onemocnění způsobující kromě genitálních bradavic i řadu malignit, nejčastěji rakovinu děložního hrdla. Nejúčinnější způsob prevence představuje očkování. Existují zatím tři typy vakcín, přičemž nejnovější nonavalentní vakcína poskytuje až 90% ochranu proti HPV, které způsobují cervikální karcinom, oproti předchozí 70% ochraně při použití bivalentní nebo kvadrivalentní vakcíny. Cíl Hlavním cílem diplomové práce bylo zjistit informovanost i postoje studentů středních škol o očkování proti HPV a prověřit jejich znalosti o HPV. Dále zjistit proočkovanost respondentů a porovnat s daty z předchozích diplomových prací, včetně srovnání znalostí o HPV a příslušné prevenci. Metodika Data byla získána pomocí dotazníkové šetření, které se uskutečnilo na třech středních školách. V prosinci 2017 na Gymnáziu v Mladé Boleslavi, poté během června 2018 na Gymnáziu v Brandýse nad Labem, a nakonec v září 2018 na Gymnáziu v Chotěboři. Získaná data byla zaznamenána do tabulky v programu Microsoft Excel a poté statisticky zpracována pomocí programu SPSS pro Windows. Statistické zhodnocení bylo provedeno s pomocí t-testu a Pearsonovým...
|
|
|
Ovlivnění signalizace Notch v nádorech indukovaných papilomaviry
Bujnovská, Ludmila ; Šmahelová, Jana (vedoucí práce) ; Grantz Šašková, Klára (oponent)
Signalizační dráha Notch ovlivňuje diferenciaci, buněčnou smrt a proliferaci buněk. Jedná se o evolučně konzervovanou signalizační dráhu, důležitou v procesu embryogeneze a vývoje organismu. Deregulace této dráhy může mít vliv na transformaci buněk v nádorové. Buňky různých typů nádorů často obsahují mutace v genech nebo jiné změny této signalizační dráhy. Její role ve vztahu k onkogenezi má dvojí charakter - v některých případech působí jako onkogenní dráha, jindy má tumor-supresivní účinek. Tento charakter se liší v závislosti na buněčném kontextu. Velkou skupinou nádorů, kde jsou prokázané změny v signalizaci Notch, jsou dlaždicobuněčné nádory hlavy a krku (HNSCC). Jedná se o 7. nejčastější typ karcinomů a je spojen s vysokou smrtností. Až 25 % těchto nádorů je etiologicky spojeno s infekcí lidskými papilomaviry (HPV). Signalizační dráhy se schopností ovlivnění buněčného cyklu, včetně dráhy Notch, jsou hlavním cílem působení onkogenních virů, mezi kterými HPV nejsou výjimkou. Tato práce popisuje změny v signalizační dráze Notch v HNSCC indukovaných HPV a účinek virových onkoproteinů E6 a E7 na tuto signalizační dráhu.
|
host ::
RSS.